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目的 建立HBV ccc DNA在胎盘组织中定性及定位检测方法,了解慢性HBV 感染者胎盘组织中HBV ccc DNA的存在状况,进一步探讨其意义及乙型肝炎病毒母婴传播机制.方法 选取首都医科大学北京地坛医院慢性乙型肝炎病毒感染者孕晚期胎盘组织40 例,阳性对照肝组织标本3 例,阴性对照为健康足月妊娠产妇胎盘标本,共5例.所有胎盘标本均分两份,分别于-80 ℃冷冻和福尔马林室温浸泡保存.冷冻标本采用质粒抽提法提取胎盘组织中HBV ccc DNA ,液相PCR 定性检测;福尔马林处理标本作石蜡切片,用于原位PCR 定位检测.结果 40例标本中,液相PCR 检测出HBV ccc DNA 阳性者8例,其相应的血清HBV DNA 均 >105 拷贝/ml .取该8例及另2例乙型肝炎患者孕晚期胎盘石蜡切片经HBV ccc DNA 原位扩增,7 例检测出HBV ccc DNA 阳性,胎盘绒毛毛细血管内皮细胞、绒毛合体滋养层细胞、PBMC 等多种细胞均存在HBV ccc DNA 阳性信号.结论 研究表明,胎盘组织HBV 感染与孕妇血液中HBV DNA 含量显著相关.胎盘组织的HBV ccc DNA 原位PCR 检测显示,HBV 可感染胎盘各层细胞.羊膜上皮细胞中也发现HBV ccc DNA 阳性信号.胎盘组织感染的HBV 及其在这些细胞中的复制是否直接与HBV宫内感染相关尚需进一步研究.
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