摘要:
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目的 将真核表达载体pcDNA3.1 (-)HCV core 转染到HepG2 细胞,在HepG2 细胞中表达HCV核心蛋白,并筛选其中的差异表达基因.方法 将构建的真核表达载体pCDNA3.1 (-)HCV core 转染HepG2 细胞后进行蛋白免疫印迹检测;将pcDNA3.1 (-)HCV core 和pcDNA3.1 (-)载体分别转染HepG2 细胞后,提取mRNA 并逆转录为cDNA ,运用基因表达谱芯片技术分析差异表达基因.结果 构建的真核表达载体经双酶切鉴定;转染HepG2 细胞后HCV 核心蛋白表达经蛋白免疫印迹证实;经基因表达谱芯片分析发现,其中基因表达水平显著上调和下调的分别是181 个和48 个.结论 筛选HCV 核心基因转染HepG2 细胞后的糖类和脂类物质代谢相关的差异表达基因,从而为丙型肝炎病毒合并糖尿病、脂肪肝等代谢性疾病的分子生物学机制的研究提供了重要依据.
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